文献类型: 中文期刊
作者: 竺利红 1 ; 施跃峰 1 ; 吴吉安 1 ; 梁建根 1 ; 李翀 2 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所
2.北京大学医学部基础医学院.北京.100083
关键词: 苏云金芽胞杆菌;杀虫晶体蛋白;HL-60细胞;Caspase;凋亡
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1674-7968
年卷期: 2010 年 18 卷 01 期
页码: 104-109
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 研究Caspase家族与Bcl-2家族参与调控苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt9875杀虫晶体蛋白对人急性髓细胞性白血病细胞HL-60的影响。本实验采用MTT法检测了杀虫晶体蛋白诱导HL-60细胞凋亡后的Caspase家族的活性和Caspase凋亡酶抑制剂对杀虫晶体蛋白诱导HL-60细胞凋亡的影响;采用Westernblot检测了杀虫晶体蛋白诱导多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)降解、Bcl-2/Bax调控和细胞色素C的释放。研究结果表明,杀虫晶体蛋白作用HL-60细胞后,激活了Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9,在48h内Caspase家族抑制剂(Z-VAD-FMK)、Caspase-3抑制剂(Z-DEVD-FMK)和Caspase-9抑制剂(Z-LEHD-FMK)均可显著抑制杀虫晶体蛋白诱导的细胞凋亡;杀虫晶体蛋白可明显上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并观察到胞浆中细胞色素C的释放。初步证明了Bt9875杀虫晶体蛋白诱导的HL-60细胞凋亡是由Caspase家族和Bcl-2家族共同调控的,线粒体途径在诱导细胞凋亡过程中起着重要作用。
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