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一步法TaqMan(R)探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 路斌 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 李军星 1 ; 郭勇 1 ; 王一成 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;实时荧光定量RT-PCR;一步法

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2012 年 24 卷 003 期

页码： 396-403

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan(R)探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法.结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性.应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性).建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查.

  • 相关文献

[1]一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用. 路斌,袁秀芳,徐丽华,李军星,郭勇,王一成. 2012

[2]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M融合蛋白的重组腺病毒的构建及其对小鼠的免疫原性. 云涛,倪征,余斌,陈柳,华炯钢,王根荣,刘光清. 2009

[3]含FMDV 2A序列PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定. 云涛,倪征,余斌,陈柳,华炯钢,王根荣,张彦明,刘光清. 2009

[4]猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白研究进展. 刘焕,王一成,袁秀芳,徐丽华. 2007

[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆、表达与免疫印迹. 刘焕,冉多良,王一成,袁秀芳,徐丽华. 2008

[6]猪繁殖与呼吸综合征病毒NB/04株全基因组分子特征分析. 云涛,刘光清,王根荣,倪征,余斌,张明华,梁华丽,华炯钢,李双茂. 2008

[7]鼻黏膜复合佐剂LTB-Rg1在小鼠体内对猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗的增强作用及其生物安全性评价. 苏菲,薛银,徐丽华,李军星,余斌,袁秀芳. 2022

[8]一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用. 袁秀芳,路斌,徐丽华,李军星,王一成. 2015

[9]利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在家蚕表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的E蛋白和M蛋白. 王丹,BHASKAR Roy,李兴华,杨华军,周芳,缪云根,云涛,刘光清. 2010

[10]2004年-2009年浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析. 徐丽华,袁秀芳,李军星,申世川,张鲁滨,曹会敏,王一成. 2011

[11]规模猪场4大疫病的血清学检测及免疫抑制病因分析. 徐丽华,王一成,袁秀芳,周继勇,张 存,叶伟成,商绍斌. 2009

[12]共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定. 云涛. 2009

[13]E.coli LTb与PRRSV gp5融合基因原核表达及小鼠免疫效果研究. 袁秀芳. 2009

[14]一步法TaqMan(R)探针实时荧光定量RT-PCR快速检测猪繁殖与呼吸综合征方法的建立及初步应用. 路斌,袁秀芳,徐丽华,李军星,王一成. 2013

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