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多枝赖草高分子量核DNA的有效制备

文献类型: 中文期刊

作者: 周玉雷 1 ; 徐粤宇 2 ; 赵茂林 3 ; 曹致中 1 ; 王志平 4 ;

作者机构: 1.甘肃农业大学草业学院

2.首都师范大学生命科学学院

3.北京市农林科学院农业生物技术研究中心

4.北京市土肥工作站

关键词: 多枝赖草;高分子量核DNA;脉冲场电泳

期刊名称: 草业科学

ISSN: 1001-0629

年卷期: 2007 年 24 卷 10 期

页码: 56-60

收录情况: CSCD

摘要: 以多枝赖草Leymus multicaulis黄化苗幼嫩叶片为材料,在液氮中研磨成粉末,加入冰冷的细胞核抽提缓冲液,经一系列钢制细胞筛过滤,离心分离细胞核,相差显微镜镜检后,用低熔点琼脂糖包埋,蛋白酶K原位裂解,经脉冲场电泳分离,用1%低熔点琼脂糖回收获得了较纯净的分子量大于2 Mb的核DNA,Southern杂交显示没有叶绿体和线粒体DNA的污染。利用该方法制备的高分子量核DNA,可用于后续可转化人工染色体(TAC)文库的构建和基因组分析。

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