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鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 季权安 1 ; 刘燕 1 ; 肖琛闻 1 ; 韦强 1 ; 霍翠梅 2 ; 鲍国连 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

2.山东省济宁市畜牧兽医局

关键词： 菌落PCR;常规PCR;鸭疫里默氏杆菌;OMPA基因

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2012 年 24 卷 03 期

页码： 388-391

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法。根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670 bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性;将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌;建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带。结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值。

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