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黄秋葵LCYE基因的克隆与表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李永平 1 ; 陈敏氡 1 ; 朱海生 1 ; 温庆放 1 ; 刘建汀 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院作物研究所/蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心

关键词: 黄秋葵;叶黄素;番茄红素ε-环化酶(LCYE);超高效液相色谱法(UPLC)

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2017 年 25 卷 10 期

页码: 1600-1611

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: ε-番茄红素环化酶(lycopene epsilon-cyclase,LCYE)是参与类胡萝卜素合成的关键酶,在类胡萝卜素合成中发挥着重要作用。为了探究黄秋葵(Hibiscus esculentus)中LCYE基因的功能,本研究成功克隆了黄秋葵类胡萝卜素合成途径中下游LCYE,其cDNA全长1 845 bp,具有1 605个碱基的完整开放阅读框(ORF),编码534个氨基酸,理论分子量(Mw)为59.73 kD,等电点(pI)为6.22。黄秋葵LCYE与亚洲棉(Gossypium arboretum)、可可(Theobroma cacao)及麻风树(Jatropha curcas)同源蛋白的相似性均在80%以上,具高度的保守性,将基因命名为HyLCYE,GenBank登录号为:KX257999。荧光定量分析表明,LCYE在黄秋葵成熟叶中表达最高,果实发育中以花后3 d高表达。应用超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)对叶黄素含量进行分析,在不同发育时期的叶中,成熟叶中叶黄素含量最高;在果实中,以花后3 d的果实含量最高。结果表明,HyLCYE基因表达与叶黄素含量成正相关。不同基因型秋葵品种同一时期的类胡萝卜素以绿色品种最高,红色秋葵品种次之,白色秋葵品种总含量最低。该实验结果为进一步开发利用黄秋葵提供了科学依据。

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