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ETR1靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 肖苏生 1 ; 张颖 1 ; 张春发 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： ETR1;RNA干扰;短发夹环RNA;重组体

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2008 年 36 卷 21 期

页码： 88-90+114

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]构建拟南芥乙烯受体(ETR1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体。[方法]从ETR1基因cDNA序列上选取目标序列,设计2对引物,经PCR扩增得到正反向2个DNA片段(S5I和AI),构建含有该正反向互补重复序列DNA片段的中间载体,测序分析正确后再克隆到植物表达载体pCAMBIA1301中的Gus位置并经双酶切证实。[结果]ETR1基因S5I和AI片段被成功克隆进质粒pCAM-BIA1301中,酶切鉴定及测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片段的序列完全一致。[结论]ETR1靶向RNA干扰重组体的成功构建,为进一步获得拟南芥乙烯受体基因的功能缺失突变体奠定良好基础。

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