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甘蔗茎RNA提取方法研究

文献类型： 中文期刊

作者： 陈萍 1 ; 罗挺 1 ; 蔡文伟 2 ;

作者机构： 1.热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室

2.中国热带农业科学院生物科学与技术研究所

关键词： 甘蔗;茎;RNA;提取方法

期刊名称： 农业科学与技术(英文版)

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2010 年 011 卷 003 期

页码： 43-46

摘要： [目的]找出提取甘蔗茎RNA的适宜方法.[方法]采用SDS法、试剂盒法、GHCL法3种方法提取甘蔗茎基因组RNA,并对提取的RNA进行质量比较.[结果]试剂盒法提取的RNA产率高,电泳条带清晰,RNA完整性好,无明显降解,OD260/OD280比值较好.试验操作要点:在RNA的提取过程中必须使操作温度保持在4 ℃左右(操作时温度可以通过垫加冰块来实现),从而充分抑制RNase的活性;植物组织称取要适量,将植物组织在液氮中充分研磨后,应在液氮还未充分挥发前将研磨物加入Eppendorf管中,样品要充分研磨,通过加大提取液中变性剂的量防止在此过程中内源RNase将植物组织中RNA降解;在用酚/氯仿/异戊醇抽提及氯仿/异戊醇抽提过程中,吸取上清液时,应尽量小心,不要吸取中间层从而防止酚类、蛋白质类的干扰.此外,提取的RNA还应及时保存于-70 ℃低温下,避免频繁冻融影响其质量以及RNA的降解.[结论]试剂盒法是有效提取甘蔗茎RNA的方法.该研究为甘蔗的分子生物学研究奠定了基础.

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