文献类型： 中文期刊

作者： 王佳莉 ¹ ; 梁晓宇 ¹ ; 柯宇航 ² ; 冼雪梅 ¹ ; 王立丰 ³ ; 王萌 ¹ ; 张宇 ¹ ;

作者机构： 1.海南大学三亚南繁研究院

2.海南大学热带农林学院

3.中国热带农业科学院橡胶研究所

关键词： 橡胶树白粉菌;酵母双杂交文库;HbCNL2;互作蛋白

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2024 年 54 卷 006 期

页码： 1103-1113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 由橡胶树白粉菌（Oidium heveae）引起的橡胶树白粉病是影响橡胶产业的主要叶部病害之一，可导致橡胶树大量落叶，严重影响胶乳产量。培育和种植抗病品种是防治该病害最经济有效的措施，因此研究橡胶树抗白粉病蛋白及其调控网络对于解析橡胶树抗白粉病机制具有重要意义。本研究以O.heveae HO-1菌株接种后48 h和0 h （接种前）混合的古铜期橡胶树叶片为样本，利用Gateway技术构建了白粉菌侵染的橡胶树叶片cDNA初级文库，通过LR重组技术将初级文库分别重组到pGADT7-DEST和pPR3-N-DEST次级文库载体上，构建出膜体系和核体系酵母双杂交次级文库。这两个文库容量均大于1.0×10^-7 CFU,重组率为100%,插入片段长度在0.1～2.0 kb之间，平均长度为1.5 kb。同时，我们分别构建了橡胶树抗病蛋白HbCNL2的全长和富含亮氨酸重复（Leucine-rich repeat, LRR）结构域诱饵载体，并在核体系酵母文库中筛选出7个可能与HbCNL2 LRR结构域互作的蛋白。进一步通过酵母双杂交点对点验证，确定了HbKLCR1、HbGAIP这两个蛋白与HbCNL2 LRR结构域的互作。GO注释分析显示HbKLCR1具有蛋白质结合活性，HbGAIP参与赤霉素信号传导过程，二者可能在橡胶树的抗病反应中发挥作用。本研究构建的cDNA文库质量较高，完整性较好，为筛选获得针对白粉病菌的抗病蛋白、解析这些蛋白的功能以及构建蛋白质互作调控网络奠定了基础。