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香蕉枯萎病菌4号生理小种β2-微管蛋白基因敲除与表型分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘远征 1 ; 漆艳香 1 ; 曾凡云 1 ; 丁兆建 1 ; 何壮 1 ; 彭军 1 ; 张欣 1 ; 谢艺贤 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

关键词: 香蕉枯萎病菌;β2-微管蛋白;基因敲除;致病力

期刊名称: 果树学报

ISSN: 1009-9980

年卷期: 2018 年 35 卷 012 期

页码: 1467-1477

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]克隆并鉴定香蕉枯萎病菌(Foc4)β2-微管蛋白(β2-tub)基因,阐明β2-tub在多菌灵的抗药性及在病原菌致病过程中发挥的作用.[方法]采用PCR技术克隆了β2-tub的序列全长,并对其进行生物信息学分析.应用Splitmarker同源重组技术获得Foc4的β2-tub基因敲除突变体,并对其突变体的生物学表型、致病力及其对多菌灵的敏感性进行测定.[结果]生物信息学分析表明,Foc4 β 2-tub基因全长为1 694 bp,cDNA编码区全长1 347 bp,由4个内含子和5个外显子组成,编码蛋白含448个氨基酸.Foc4对多菌灵表现为敏感(EC50=0.51 μg·mL-1),与Foc4相比,β 2-tub基因敲除突变体对多菌灵的敏感性(EC50=0.36 μg·mL-1)表现显著增强,差异显著(p<0.05).与Foc4相比,β2-tub基因敲除突变体的生物学表型没有变化,对巴西蕉苗的致病力明显减弱.[结论]β2-tub基因具有高度保守性,β2-tub基因敲除突变体对细胞壁选择性压力、氧化压力和渗透压力均没有影响,但致病力下降,同时β2-tub基因的变化会引起Foc4对多菌灵抗性的改变.

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