文献类型： 中文期刊

作者： 徐翔飞 ¹ ; 黄盼 ¹ ; 崔雪梅 ¹ ; 黄叶娥 ¹ ; 季权安 ¹ ; 韦强 ¹ ; 肖琛闻 ¹ ; 鲍国连 ¹ ; 刘燕 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;浙江农林大学动物科技学院·动物医学院

关键词： 猪大肠埃希菌;猪沙门氏菌;双重PCR

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2023 年 64 卷 004 期

页码： 957-963

摘要： 旨在建立一种针对猪大肠埃希菌和沙门氏菌的特异、 高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测.本研究针对大肠埃希菌保守序列16SrRNA基因和沙门氏菌的特异性基因侵袭蛋白A基因(invA),采用Primer 3.0 Plus分别设计合成两对特异性引物,在此基础上建立并优化双重PCR反应体系.结果显示,该双重PCR检测方法能有效扩增出猪大肠埃希菌和沙门氏菌的144 bp和610 bp的特异性片段,PCR产物测序结果为目标片段;对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、巴氏杆菌、波氏杆菌、链球菌的扩增结果均为阴性.将该方法应用于临床样品检测,对55例病猪的血液和组织样品进行分离检测,检测出大肠埃希菌12例,沙门氏菌4例,混合感染1例,与已报道的PCR检测方法符合率为98.20%.表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪大肠埃希菌、沙门氏菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法.