文献类型: 中文期刊
作者: 刘济宁 1 ; 刘贤进 1 ; 余向阳 1 ; 彭正强 2 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院
2.中国热带农业科学院
关键词: 苏云金芽孢杆菌;枯草芽孢杆菌;重迭PCR;Cry1Ac基因;杀虫活性
期刊名称: 昆虫学报
ISSN: 0454-6296
年卷期: 2005 年 48 卷 03 期
页码: 342-346
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHD_73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcFR和PxyFR,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以PxyFCry1AcR作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylR_Cry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylR_Cry1Ac插入大肠杆菌_苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。工程菌株质粒酶切电泳分析、SDS_PAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAAS01D中的有效表达。
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