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大肠杆菌异质型ACCase亚基基因accB重组表达载体的构建和原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王伏林 1 ; 郎春秀 1 ; 吴关庭 1 ; 陈锦清 1 ;

作者机构： 1.浙江省农科院病毒学与生物技术研究所

关键词： ACCase;accB;载体构建;原核表达;IPTG诱导

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2009 年 25 卷 23 期

页码： 74-77

收录情况： 北大核心

摘要： 生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)负责将羧基从生物素羧化酶转移到羧基转移酶上,对于长链脂肪酸的从头合成与种子含油量的形成具有十分重要的作用。以大肠杆菌E.coli DH5α的DNA为模板,根据大肠杆菌基因组的Genbank中的核苷酸序列,设计2条特异引物进行扩增,克隆了大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACCase)的生物素羧基载体蛋白亚基基因accB,构建accB的原核表达载体pGEX-4T-accB,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株,IPTG诱导进行融合表达,成功诱导表达了GST-accB融合蛋白,大小为43 kDa,该基因的原核表达为蛋白的纯化和进一步研究其功能及应用打下了良好的基础。

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