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水稻种子蛋白双向电泳方法的建立和质谱初步分析

文献类型： 中文期刊

作者： 朱方超 1 ; 贾瑞宗 2 ; 孙勇 2 ; 王雪君 2 ; 徐林 2 ; 孔华 2 ; 郭运玲 2 ; 郭安平 2 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国医学科学院药用植物研究所海南分所

关键词： 水稻种子;蛋白组学;双向电泳

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2015 年 13 卷 11 期

页码： 2446-2452

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立适用于水稻(Oryza sativa L.)种子蛋白质组分析的双向电泳方法,本研究比较了三氯乙酸/丙酮法和改良的酚提取法对水稻种子蛋白的提取效果,不同蛋白提取液上样量、不同p H梯度(p H 3~10和p H 4~7)IPG胶条对水稻种子蛋白的分离效果。结果表明:在目前的双向电泳体系下,采用改良的酚提取法,24 cm p H 4~7线性IPG胶条,上样量1 200~1 500μg的条件可以获得分辨率高、重复性好、胶内蛋白点适用于后续质谱分析的双向电泳图谱。最后本实验通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)对10个随机挑选的胶内蛋白质点进行了初步蛋白质鉴定分析,进一步确定了改良的酚提取法可以适用于水稻种子蛋白质双向电泳分析。

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