文献类型： 中文期刊
作者： 张俊环 1 ; 王玉柱 1 ; 孙浩元 1 ; 杨丽 1 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院林业果树研究所
关键词： 杏;树皮;可溶性总蛋白;提取
期刊名称： 北方园艺
ISSN： 1001-0009
年卷期： 2009 年 11 期
页码： 59-61
收录情况： 北大核心
摘要： 为从杏树皮组织中获取高质量的可溶性总蛋白,选择经过冬季自然低温驯化的1 a生杏树新梢为试材,比较分析提取缓冲液中分别添加2%SDS,不同浓度的Tween 20,以及高浓度PVPP对可溶性总蛋白提取浓度和质量的影响。结果表明:提取杏树皮可溶性总蛋白的最佳缓冲液体系为:5 mL 50 mmol/L的Tris-HCl缓冲液(其中含2 mM EDTA-Na2,10 mmol/L抗坏血酸,0.5 mmol/L DTT,0.1 mmol/L PMSF,1%(w/v)PVPP,pH 8.0)和0.5%Tween20。丙酮浓缩方法中加入蛋白粗提液2倍体积的冷丙酮是最理想的。经过提取和浓缩的蛋白浓度可达0.773μg/μL,电泳分析中的条带多而清晰,可用于后续的目的蛋白纯化试验及功能分析。
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