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苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性

文献类型: 中文期刊

作者: 崔婷婷 1 ; 杜立新 2 ; 彭琦 3 ; 张杰; 高继国; 宋福平;

作者机构: 1.东北农业大学生命科学学院

2.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

3.河北省农林科学院植物保护研究所

关键词: 苏云金芽胞杆菌;cry基因启动子;转录活性;Cry晶体蛋白;晶体蛋白表达

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2019 年 1 期

页码: 30-36

收录情况: 北大核心

摘要: 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E.分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性.本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件.

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