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一种启动子克隆的改良Adaptor-PCR方法及在橡胶树上的应用实例

文献类型： 中文期刊

作者： 辛鲁生 1 ; 阳江华 2 ; 唐朝荣 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.海南大学农学院;中国热带农业科学院橡胶研究所

关键词： 橡胶树;启动子克隆;Adaptor-PCR;方法改良;应用实例

期刊名称： 植物研究

ISSN： 1673-5102

年卷期： 2012 年 32 卷 03 期

页码： 296-303

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 真核生物通过顺式作用元件和反式作用因子相互作用实现基因的转录调控,而启动子区域含有多种顺式元件,作为基因表达调控网络的枢纽控制着基因转录的起始与效率,一直是基因表达调控研究的重点[1]。本文提供了一种改良的基于Adaptor-PCR启动子克隆方法,改进了接头序列,设计了适合两步法PCR的接头引物。选取了25种限制性内切酶对橡胶树基因组DNA进行酶切,在所有酶切产物都平端化后,与改进的接头连接,成功构建了以Adaptor-PCR为基础的橡胶树基因启动子克隆文库,并利用此文库成功克隆了橡胶树6个蔗糖转运蛋白基因、1个转化酶基因和1个海藻糖合酶基因的启动子。本文研究结果为橡胶树基因启动子克隆提供了一个高效平台,也为其他生物基因启动子克隆提供了有益的参考。

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