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巴西橡胶树HbUBC22基因克隆与表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 覃碧 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词： 巴西橡胶树;泛素结合酶;HbUBC22;基因克隆;表达分析

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2013 年 29 卷 19 期

页码： 1-8

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 泛素蛋白酶体途径(UPP)广泛参与植物生长发育相关过程的调控,巴西橡胶树UPP关键酶-泛素结合酶UBC/E2基因的克隆及其表达分析,将为进一步研究UPP在橡胶树中的功能奠定基础。本研究通过同源克隆法,根据巴西橡胶树UBC22同源EST序列进行拼接设计特异引物,利用RT-PCR扩增从橡胶树中克隆UBC22基因,利用生物信息学的方法对基因的结构进行分析,进一步采用Q-PCR技术分析基因表达模式,并在大肠杆菌中表达目标蛋白。将克隆的基因命名为HbUBC22,该基因的开放阅读框(ORF)共807bp,编码268个氨基酸,编码蛋白含有1个保守的UBC结构域和半胱氨酸催化位点。HbUBC22蛋白与蓖麻、杨树、油茶和葡萄的UBC蛋白同源性最高,分别为89%、85%、85%和81%。HbUBC22受乙烯利和茉莉酸甲酯诱导显著上调表达。经IPTG诱导后,HbUBC22能够在大肠杆菌中表达出目标蛋白。通过对HbUBC22的克隆及其序列分析可知,该基因属于泛素结合酶UBC/E2家族成员,以上研究结果为进一步研究HbUBC22的生物学功能奠定了良好的基础。

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