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利用微波-热效应进行限制性内切核酸酶反应的可行性验证

文献类型： 中文期刊

作者： 穆慧敏 1 ; 姜华 2 ; 王艳丽 2 ; 孙国昌 2 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

2.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所;南京农业大学植物保护学院

关键词： 酶切;微波炉;微波

期刊名称： 中国生物化学与分子生物学报

ISSN： 1007-7626

年卷期： 2012 年 28 卷 04 期

页码： 380-384

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 限制性内切酶催化的酶解反应是分子生物学实验中的常用技术.鉴于酶切反应时间长,有人提出采用微波释放的热效应催化限制性内切酶解反应,以期缩短酶解时间.但微波是否能代替传统酶切反应还需验证.本研究设计了一系列的酶切试验,验证微波酶切是否有效.结果表明:短时间(2 min)微波炉高火处理未导致DNA降解及内切酶失活.对于质粒的单酶切和部分双酶切,短时间(2 min)微波炉处理可替代水浴加热完成酶解反应.对于部分双酶切体系,微波炉处理酶切不完全,不能替代温水浴.使用微波酶解需严格控制时间,切勿时间过长.

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