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牛大力漆酶基因CsLAC17的克隆与载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 罗冬梅 1 ; 赵亚文 1 ; 荆永琳 1 ; 徐立 1 ; 李志英 1 ;

作者机构： 1.南京农业大学园艺学院;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室;海南大学热带农林学院

关键词： 牛大力;CsLAC17;基因克隆;组织表达特异性;表达载体

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2019 年 06 期

页码： 1906-1912

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究漆酶在牛大力生长发育过程中的生物学功能,本实验以牛大力叶片为材料,从反转录PCR获得的cDNA中扩增出漆酶基因CsLAC17全长。序列分析表明,CsLAC17 c DNA全长为2 010 bp,开放阅读框大小为1 755 bp,编码一个由584个氨基酸组成的蛋白质。结构域分析表明,Cs LAC17蛋白的保守结构域具有漆酶典型结构域的特征——铜离子结合域(Cu-oxidase和Cu-oxidase-2)。同源序列分析表明,Cs LAC17蛋白序列与绿豆(Vigna radiata var. radiata)和野生大豆(Glycine soja)同源性为88%、藜豆(Mucuna pruriens)87%、蒺藜苜蓿(Medicago truncatula) 85%。组织特异性表达分析显示,CsLAC17在茎中表达量最高,叶中表达量次之,根中较少。此外,进一步构建了pBI121-CsLAC17过表达载体并转入农杆菌。本研究为日后CsLAC17基因的功能验证以及为牛大力开展分子生物学研究提供帮助。

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