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白木香基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 邹枚伶 1 ; 夏志强 1 ; 王文泉 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院/热带生物技术研究所

关键词： 白木香;DNA提取;ISSR;PCR反应体系

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2009 年 25 卷 02 期

页码： 250-254

收录情况： 北大核心

摘要： 白木香为瑞香科沉香属植物,是中国特有的珍贵药用植物,也是国产沉香药材唯一资源植物,现已濒临灭绝,被载入《中国植物红皮书》。采用改良CTAB法提取白木香DNA较传统方法简单高效。通过琼脂糖凝胶电泳和OD260/OD280比值测定,所得基因组DNA纯度高,可作为ISSR等以PCR为基础的DNA多态性标记。通过优化影响白木香ISSR-PCR的主要参数,确立了适用于白木香的ISSR反应体系和扩增条件。结果表明在20μl反应体中,模板DNA、引物、Mg2+、dNTP和Taq DNA聚合酶5种主要成分的最适浓度分别为25ng、0.8μmol/L、2.5mmol/L、0.2mmo1/L、1.0U,扩增出足量产物至少需要35个循环。

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