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柱花草nptII、hpt和bar基因优化转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 段瑞军 1 ; 胡新文 1 ; 符少萍 1 ; 郭建春 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带生物技术国家重点实验室

关键词: 柱花草;转化体系;nptII;hpt;bar

期刊名称: 生命科学研究

ISSN: 1007-7847

年卷期: 2005 年 03 期

页码: 232-237

收录情况: CSCD

摘要: 以热研5号柱花草(Stylosanthes guianensis cv.Ryan No.5)为材料,系统地研究了不同选择标记基因NptII,hpt和bar的柱花草转化体系.研究发现柱花草最适合基因转化的外植体是幼苗下胚轴.最佳愈伤组织形成和愈伤组织分化培养基为M S+NAA 1.0m g/L+6B-A4.0m gL/+3%蔗糖,pH6.最适宜外植体生根培养基是MS+N AA0mg/L+3%蔗糖(pH6).Glufosinate选择压力为0.15m g/L,Kanam ycin选择压力为20mg/L,Hygrom ycin选择压力为15m g/L.在以上的优化转化系统中,柱花草幼苗下胚轴分别侵染带NptII,hpt和bar基因的农杆菌(GV 3101)后,可获得30%愈伤组织具有kanamycin抗性,5%愈伤组织具有Hygromycin抗性,50%的愈伤组织具有Glufosinate抗性.

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