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A型塞内卡病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 郭金硕 1 ; 侯磊 2 ; 全荣 2 ; 王菁 2 ; 韦莉 2 ; 刘爵 2 ;

作者机构： 1.北京农学院动物科学技术学院

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽传染病防控技术北京市重点实验室

关键词： A型塞内卡病毒;VP1蛋白;杂交瘤细胞;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 2022 年 58 卷 003 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心

摘要： 为制备抗A型塞内卡病毒(SVA)VP1蛋白的单克隆抗体,并初步应用于A型塞内卡病毒的检测,本研究构建了SVA VP1原核重组表达质粒pET30a-GST-VP1(528 bp).将重组质粒转化大肠埃希菌BL21感受态细胞并大量表达VP1重组蛋白,利用纯化的VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)进行融合,经过细胞亚克隆筛选,获得杂交瘤细胞.将其选为腹水生产细胞株,最后纯化单克隆抗体,通过Western blotting和间接免疫荧光试验对其进行鉴定.结果显示,本研究获得1株能够稳定分泌抗VP1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,其亚型重链为IgG2a、轻链为Kappa链;Western blotting和间接免疫荧光检测显示,该单克隆抗体能够特异性识别SVA病毒粒子.本研究成功制备的抗SVA VP1蛋白单克隆抗体可为进一步研究A型塞内卡病毒VP1蛋白的生物学功能及A型塞内卡病毒致病机制提供有效途径.

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