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开花调控基因BpMADS4无抗性表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李玉生 1 ; 吴永杰 1 ; 赵艳华 1 ; 吴雅琴 1 ; 程和禾 1 ; 陈龙 1 ;

作者机构： 1.河北省农林科学院昌黎果树研究所

关键词： 开花调控基因(BpMADS4);GFP基因;转基因;表达载体构建

期刊名称： 河北农业科学

ISSN： 1008-1631

年卷期： 2012 年 16 卷 01 期

页码： 57-63

摘要： 为了构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp,参考已发表的欧洲白桦(Betula pendula)开花调控基因(BpMADS4)序列,利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从欧洲白桦的幼嫩花序中克隆得到促进开花的BpMADS4基因。将该基因替换pCAMBIA1302载体中的潮霉素抗性基因,构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAM-BIA1302-GFP-Bp。结果表明:成功构建了无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp。该表达载体在苹果遗传转化中不使用抗生素筛选,可以解决抗生素抗性筛选降低苹果转基因转化效率的问题以及转基因苹果中选择标记基因造成的生物安全性问题,用该载体转化苹果可以缩短苹果童期,有效提高其育种效率。本研究为筛选对环境安全的、具有易成花特性的苹果新种质奠定了基础。

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