文献类型： 中文期刊

作者： 靳换 ¹ ; 孟昭英 ² ; 涂敏 ¹ ; 沈佳 ¹ ; 史爱华 ¹ ; 赵蕾 ¹ ; 习硕 ¹ ; 张建伟 ¹ ; 章振华 ¹ ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

2.北京农学院动物科学技术学院

关键词： 鸡γ-干扰素(chIFN-γ);鸡补体受体2(chCR2);相互作用;亲和力

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2024 年 51 卷 010 期

页码： 4476-4484

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]研究鸡 γ-干扰素(chicken interferon γ,chIFN-γ)与鸡补体受体 2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础.[方法]通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用,并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式.[结果]成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒.将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞,结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用;将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞,结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位.表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362 μmol/L,二者之间有较高的亲和力.分子对接试验结果显示,chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用,Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用.[结论]本研究结果证明了 chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用,且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用.