文献类型： 中文期刊
作者： 张智 1 ; 王永勤 2 ; 关绚丽 1 ; 李梅兰 1 ; 侯雷平 1 ; 梁毅 2 ;
作者机构： 1.山西农业大学园艺学院
2.北京市农林科学院蔬菜研究中心
关键词： 胡萝卜;线粒体;mtDNA;提取方法;PCR
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2010 年 26 卷 13 期
页码： 58-62
收录情况： 北大核心
摘要： 提取高质量的线粒体DNA,对植物细胞质雄性不育的研究起着关键性的作用。以胡萝卜叶片为材料,通过高盐差速离心和蔗糖沉淀差速离心2种方法提取线粒体DNA。通过改变分离和沉淀线粒体离心力大小、使用DNaseⅠ处理得到了无核DNA污染的线粒体。用SDS和蛋白酶K裂解线粒体经酚/氯仿/异戊醇抽提除去蛋白,并用RNaseA消化从而得到单纯线粒体DNA。还特别设计了叶绿体特,异性引物检测线粒体DNA纯度。结果表明:利用优化后的蔗糖沉淀差速离心法提取胡萝卜线粒体DNA,不仅操作简单,而且所得线粒体DNA纯度高、产量高,每克叶片能够得到34.46μg线粒体DNA。
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