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中华蜜蜂性信息素结合蛋白ASP1的原核表达及配基结合特性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 翁琛 1 ; 张林雅 1 ; 赵磊 1 ; 付余霞 1 ; 罗晨 2 ; 李红亮 1 ;

作者机构: 1.中国计量学院生命科学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室

2.北京市农村科学院植物保护环境保护研究所

关键词: 中华蜜蜂;信息素结合蛋白;原核表达;分离纯化;结合功能;配基

期刊名称: 昆虫学报

ISSN: 0454-6296

年卷期: 2013 年 56 卷 10 期

页码: 1110-1116

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】研究中华蜜蜂Apis cerana cerana信息素结合蛋白ASP1与蜜蜂信息素及某些植物挥发物分子的结合功能。【方法】构建中蜂ASP1的原核表达载体,对其进行重组蛋白的诱导表达和分离纯化,并得到具有生化活性的中蜂ASP1重组蛋白,最后以1-NPN作为荧光报告探针,通过荧光竞争结合实验研究中蜂重组ASP1蛋白与蜜蜂信息素及其他气味分子的结合功能。【结果】在22种潜在信息气味物质中,有7种与中蜂ASP1有较强的结合能力,能将1-NPN的相对荧光强度降至50%以下。其中发现蜂王信息素两种成分对-羟基苯甲酸甲酯和香草醇的竞争能力最强,可分别引起1-NPN相对荧光值下降99.31%和95.50%,解离常数K D分别为13.39和98.44μmol/L;而与除蜂王信息素外的其他信息素如幼虫信息素和工蜂信息素等分子均不结合。此外中蜂ASP1对于水杨酸甲酯、苯乙醛、3,4-二甲基苯甲醛4-烯丙基藜芦醚和β-紫罗兰酮等5种植物挥发物质能产生强度不一的结合。【结论】中蜂信息素结合蛋白ASP1对蜂王信息素具有非常强的特异性,同时也能结合某些植物挥发性气味分子,暗示中蜂ASP1是一种以蜂王信息素识别为主要功能、植物挥发物识别为次要功能的多功能信息素结合蛋白。

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