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甜樱桃黄酮醇合酶基因的克隆及其表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 柳爱玲 1 ; 沈欣杰 2 ; 刘芸 2 ; 袁华招 2 ; 张晓明 2 ; 李天红 2 ;

作者机构: 1.中国农业大学农学与生物技术学院果树系

2.中国农业大学农学与生物技术学院果树系;北京市农林科学院林业果树研究所

关键词: 甜樱桃;黄酮醇合酶基因;基因克隆;原核表达

期刊名称: 中国农业大学学报

ISSN: 1007-4333

年卷期: 2013 年 18 卷 02 期

页码: 62-69

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了解黄酮醇合酶在甜樱桃类黄酮生物合成途径中的作用,根据其他物种已知的FLScDNA保守序列设计简并引物,采用RT-PCR和RACE的技术,从甜樱桃(Prunus avium.L)嫩叶中扩增获得FLScDNA全长,命名为PaFLS(GenBank登录号:JQ289290)。该基因cDNA全长为1 077bp,开放阅读框为1 014bp,编码337个氨基酸,分子质量为38ku,等电点pI为5.58。生物信息学分析表明PaFLS属于依赖2-酮戊二酸的双加氧酶家族(2OG-FeII_Oxy),该基因所编码的氨基酸序列与苹果、梨和草莓的同源性分别为99%、97%和77%。将该基因重组到表达载体pGEX4T-1中进行原核表达,电泳检测到一条约为65ku的融合蛋白(含27ku的GST标签)。组织时空表达分析表明,PaFLS在甜樱桃的花中表达量最高,这可能和黄酮醇参与花粉萌发及利于授粉有关。

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