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菠萝AcCAX1克隆及表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 陈 金绘 1 ; 姚 艳丽 1 ; 王 文波 1 ; 谭 丹 1 ; 吴 青松 1 ; 贺 军军 1 ; 朱 祝英 1 ; 付 琼 1 ; 徐 娟 1 ; 李 川玲 1 ; 张 秀梅 1 ;

作者机构: 1.华中农业大学园艺林学学院/中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;华中农业大学园艺林学学院;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室;中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/;农业农村部热带果树生物学重点实验室/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室

关键词: 菠萝;AcCAX1;Ca2+/H+反向转运蛋白;基因表达;胁迫响应

期刊名称:

ISSN: 1671-8151

年卷期: 2025 年 45 卷 1 期

页码: 52-60

摘要: 目的克隆鉴定菠萝Ca2+/H+反向转运蛋白AcCAX1,并对其全长序列和表达谱进行分析,可为该蛋白的功能研究奠定基础。方法利用PCR扩增和基因克隆技术获得AcCAX1的cDNA全长序列;通过生物信息学方法对该基因编码的氨基酸序列进行结构预测、序列比对和进化树分析;最后结合实时荧光定量PCR技术检测AcCAX1对不同离子、不同温度胁迫以及不同植物激素的响应。结果该基因开放阅读框为1428 bp,编码1个由475个氨基酸组成、相对分子质量50 801.11 Da、理论等电点为6.24的稳定疏水蛋白。序列分析表明,AcCAX1氨基酸序列中包含11个典型的跨膜结构域,组成了2个保守的Ca2+/H+反向转运蛋白结构域。CAX1蛋白二级结构中α螺旋占比最大为58.74%,其次是无规则卷曲、延伸链和β-折叠,占比分别为21.68%、14.95%和4.63%。实时荧光定量PCR分析表明,AcCAX1的转录水平可以受外源CaCl2和NaCl诱导升高,受MnCl2处理降低。AcCAX1在菠萝老叶和茎中转录水平较高,在果实和花蕾中较低。烟草亚细胞定位结果显示,AcCAX1在细胞膜、细胞质以及细胞核中均存在表达。此外,AcCAX1启动子区域包含大量非生物胁迫响应元件,并且AcCAX1转录水平受4 ℃低温和37 ℃高温胁迫显著抑制。结论AcCAX1作为菠萝中Ca2+/H+反向转运蛋白,可能在菠萝非生物胁迫响应中发挥重要作用。

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