文献类型： 中文期刊
作者： 吴娅妮 1 ; 刘玲 2 ; 王文科 3 ; 孟淑春 4 ;
作者机构： 1.山西师范大学生命科学学院
2.北京市农林科学院蔬菜研究中心
3.农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室
4.农业部都市农业(北方)重点实验室
关键词： 菠菜;AFLP;反应体系;引物筛选
期刊名称： 中国食品学报
ISSN： 1009-7848
年卷期： 2014 年 14 卷 07 期
页码： 207-213
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用改良的CTAB法提取高质量的DNA,对菠菜AFLP反应体系中酶切与连接、预扩增、选择性扩增等关键试验条件进行优化,建立了适合菠菜AFLP分析的反应体系:酶切连接采用一步法,即模板DNA150 ng,EcoRⅠ/MseⅠ各0.25 U,37℃酶切5 h,16℃连接6 h;预扩增体系浓度dNTPs 0.2 mmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,预扩增产物稀释200倍作为选择性扩增体系模板。利用优化的反应体系,从256对E+ANN/M+ANN引物组合中,筛选出20对条带清晰、多态性丰富的引物组合,为菠菜群体的遗传多样性、种质鉴定等研究提供了理论基础。
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