文献类型： 中文期刊
作者： 卢丽芳 1 ; 朱海生 2 ; 温庆放 3 ; 林义章 4 ;
作者机构： 1.福建农林大学园艺学院
2.福建省农业科学院作物研究所
3.福建省农业科学院蔬菜研究中心
4.福建省蔬菜工程技术研究中心
关键词： 南瓜;SRAP;分子标记;PCR扩增
期刊名称： 福建农业学报
ISSN： 1008-0384
年卷期： 2014 年 V29 卷 01 期
页码： 40-46
摘要： 以‘密本’南瓜作为筛选体系的材料,通过单因素试验对南瓜20μL SRAP-PCR扩增体系的Mg2+、dNTP、Taq酶、引物及DNA浓度和扩增程序的退火温度与循环次数进行优化,筛选出各组分的最佳浓度、最佳的退火温度和最佳循环次数。试验结果确立南瓜最佳的20μL SRAP体系为:0.2mmol·L-1dNTP,1.5U Taq酶,80ng DNA,0.16μmol·L-1的单条引物,Mg2+1.5mmol·L-1,2μL 10×Buffer;最佳扩增程序为:94℃预变性5min;94℃1min,35℃1min,72℃1min,5个循环;94℃1min,52℃1min,72℃1min 35个循环;最后72℃延伸10min。选用17个南瓜品种对确立扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富、特异性强、重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于南瓜的SRAP分子标记。
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