文献类型： 中文期刊
作者： 任海英 1 ; 方丽 1 ; 李岗 1 ; 茹水江 1 ; 王汉荣 1 ;
作者机构： 1.浙江省农业科学院
关键词： 甜瓜蔓枯病菌;根癌农杆菌介导的转化;T-DNA插入突变
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2010 年 26 卷 06 期
页码： 114-120
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 甜瓜蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,严重影响甜瓜的产量和品质,但是蔓枯病菌Didymella bryoniae病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究还未见报道。本研究以携带潮霉素B磷酸转移酶基因(hph)的pBIG2RHPH2作为转化载体,根癌农杆菌C58C1作为转化介体,转化甜瓜蔓枯病菌的强致病菌株DB11。研究发现,甜瓜蔓枯病菌的最优转化体系为:甜瓜蔓枯病菌的分生孢子悬浮液浓度为1×106个孢子/mL,农杆菌悬浮液OD600为0.15,共培养时间48h,诱导培养基中添加200μg/mL乙酰丁香酮,选择培养基添加100μg/mL潮霉素B、200μg/mL头孢噻肟钠、200μg/mL氨苄青霉素和200μg/mL四环素。1×105个蔓枯病菌分生孢子可以产生45个左右的转化子,随机挑取3个转化子进行PCR和RT-PCR检测发现,在不含潮霉素B的PDA培养基平板上转化子连续培养5代后,hph基因仍能稳定存在和转录,Southern blotting检测发现,T-DNA都是单拷贝插入3个转化子的染色体内。本研究建立的甜瓜蔓枯病菌的转化体系将为该病菌的功能基因研究和寄主与病原菌的互作研究提供重要技术支撑。
- 相关文献
[1]聚乙二醇(PEG)介导的甜瓜蔓枯病菌的转化(英文). 任海英,李岗,戚行江,梁森苗,郑锡良. 2013
作者其他论文 更多>>
-
腐殖酸钾对杨梅土壤改良和生长结实的影响
作者：孙鹂;张淑文;俞浙萍;郑锡良;梁森苗;任海英;戚行江
关键词：杨梅;腐殖酸钾;土壤改良;树体营养;果实品质
-
豆粕菌剂与土壤调理剂混用改善衰弱杨梅营养生长和果实品质
作者：寿林飞;韩昊;张林;孔海民;李岗;戚行江;俞浙萍;任海英
关键词：杨梅(Myrica rubra);衰弱病;豆粕菌剂;土壤调理剂;营养生长;果实品质
-
生物有机复混肥对设施杨梅树势和果实品质的影响
作者：缪晓丹;陈新炉;张林;戚行江;孙鹂;李岗;任海英
关键词：生物有机复混肥;设施杨梅;树势;果实品质
-
浙江义乌鲜食枣产业现状与发展对策
作者：楼文美;任海英;周慧芬;陈小央;张程兴
关键词：义乌;鲜食枣;发展现状;问题;发展对策
-
基施黄腐酸钾对大棚杨梅营养生长及果实品质的影响
作者：包日在;孔海民;李岗;任海英;戚行江;张淑文;张林
关键词：黄腐酸钾;大棚杨梅;春梢长;叶绿素;单果质量;总糖
-
高油酸食用型黑花生新品种浙黑甜1号的选育
作者：李付振;张小利;陈小央;刘波;厉宝仙;何爱珍;张泉锋;方丽;朱灵龙
关键词：黑花生;新品种;浙黑甜1号;高油酸
-
水稻轮作和不同土壤处理对甜瓜产量和品质的影响
作者：张志明;方丽;郭焕茹;凡改恩
关键词：微生物菌肥;甜瓜;水稻轮作;品质
