文献类型： 中文期刊
作者： 孙化鹏 1 ; 钟晓红 2 ; 乔飞 3 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室
2.湖南农业大学园艺园林学院
3.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
关键词： 洋常春藤;甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶;RACE克隆;实时荧光定量PCR;相对表达量
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2018 年 011 期
页码： 2200-2206
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶(Mevalonate diphosphate decarboxylase,MVD)是三萜皂苷生物合成途径中的关键酶,为研究其在洋常春藤中的基因功能,通过RT-PCR和RACE技术从洋常春藤叶片中克隆获得HhMVD基因的cDNA全长序列,并通过RT-qPCR技术分析其表达规律.结果表明:RACE克隆获得的HhMVD基因cDNA序列全长1 799 bp,包含一个完整开放阅读框(ORF)1 263 bp、5′非编码区(5′UTR)192 bp、3′非编码区(3′UTR)344 bp;该基因编码420个氨基酸,分子质量46.6ku,理论等电点为6.57,不含跨膜区,属于非分泌型蛋白;HhMVD蛋白具有GHMP激酶N端结构域,属于甲羟戊酸激酶系列,与刺五加、人参、三七等同科植物亲缘关系较近.RT-qPCR结果表明,洋常春藤中HhMVD基因的时空表达相对稳定,但与常春藤皂苷含量差异变化之间存在一定的负相关性.洋常春藤HhMVD基因的成功克隆及表达分析研究,为深入探讨其基因功能、阐明其在常春藤皂苷生物合成途径中的作用提供理论依据.
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