您好，欢迎访问中国热带农业科学院 机构知识库！
中国热带农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

抗真菌KP4蛋白的原核表达载体构建与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 孔冉 1 ; 冯翠莲 2 ; 李晓君 1 ; 郭婷 1 ; 张树珍 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所甘蔗研究中心

关键词： KP4;包涵体;温度;IPTG;纯化

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2012 年 40 卷 08 期

页码： 23-26

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备KP4的多克隆抗体,将KP4编码框克隆到pMD19-T中,载体经测序后,亚克隆到原核表达载体pET32a中,获得了KP4的原核表达载体PET-KP4。将构建成功的KP4原核表达载体转化宿主菌BL21(DE3)并用IPTG对重组菌进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析诱导后重组菌的总蛋白显示,融合蛋白大小约为31 ku,以包涵体形式存在;对融合蛋白的表达条件进行了优化,KP4大量表达最佳培养温度为37℃,诱导剂IPTG的最佳浓度为1.0 mmol/L,最佳诱导培养时间为8 h;对目标蛋白进行包涵体破碎,用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析对总蛋白进行了纯化。SDS-PAGE电泳分析与蛋白浓度测定结果显示,目的蛋白纯度好,浓度达到了236μg/mL。

  • 相关文献

[1]原核表达Cry3Aa蛋白对椰心叶甲的杀虫活性. 苏震,邓柳红,易小平,肖苏生,张春发. 2009

[2]苏云金芽胞杆菌S-层蛋白基因的异源表达及分离纯化. 杨晓琳,郭刚,张凤娟,孙士锋,朱朝华,曾会才. 2013

[3]包涵体蛋白的复性研究进展. 夏启玉,肖苏生,邓柳红,易小平,张春发. 2008

[4]结核分枝杆菌wbbL蛋白质可溶性表达及鉴定. 邬强,辛毅,马郁芳. 2009

[5]美洲商陆抗病毒蛋白缺失型基因PAP-C_(23)在大肠杆菌中的表达. 夏启玉,肖苏生,邓柳红,易小平,张春发. 2008

[6]温度对厚指海绵Pachychalila sp.体内真细菌组成的影响. 方再光,邓中日,湖南城市学院化学与工程系,黄勃,鲍实翔. 2005

[7]莱茵衣藻缺铁应答调控基因femu2p-C2H2的融合表达与纯化. 吴小霞,邓晓东,任大明,费小雯. 2012

[8]大孔吸附树脂法纯化木薯叶黄酮的初步研究. 陶海腾,陈晓明,吕飞杰,台建祥,付勤,李开绵. 2009

[9]香蕉束顶病毒海口分离物核穿梭蛋白(NSP)的纯化及抗血清制备. 余乃通,冯团成,王建华,刘志昕. 2010

[10]硫氧还蛋白抗体柱的制备. 畅文军,王宇光. 2011

[11]抗真菌活性物质的分离纯化及生物活性研究. 张鹏,洪葵,庄令,林海鹏. 2006

[12]番木瓜畸形花叶病毒HC-Pro蛋白的原核表达与纯化. 苏蝶,庹德财,周鹏,言普,黎小瑛,朱国鹏,沈文涛. 2024

[13]离子液体的纯化回收对纤维素溶解特性的研究. 王飞,刘欢,李积华,魏晓奕,李特. 2014

[14]农用抗生素分离纯化的研究进展. 商瑞,曾会才,毛佳. 2008

[15]超滤分离纯化菠萝蛋白酶的研究. 韩志萍,黄茂芳,静玮,张文华,罗荣琼. 2013

[16]hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原基因的克隆表达及纯化研究. 胡兵,黄超,李文静,邓柳红,肖苏生,张春发. 2009

[17]香蕉多酚氧化酶的纯化、酶学性质及活性抑制的研究进展. 袁德保,杨昭,李芬芳,谭琳,李奕星,陈娇,郑晓燕,郑丽丽. 2013

[18]菠萝皮果胶的分离纯化及组成分析. 徐雪荣,冯静,梁瑞红,刘成梅,周晶. 2012

[19]接枝不同金属配基的pH敏感型聚合物的制备及对木瓜蛋白酶的纯化. 许英豪,袁德保,张海德,李芬芳,李奕星,王朝政,陈娇,彭建,董安华. 2016

[20]一种龙眼多糖分离纯化与结构解析. 查春节,唐永富,林丽静,罗勇悦. 2013

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：中国热带农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台