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兔巴氏杆菌和波氏杆菌多重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 刘燕 1 ; 韦强 1 ; 肖琛闻 1 ; 鲍国连 1 ; 季权安 1 ; 庞安娜 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 巴氏杆菌;波氏杆菌;多重PCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2012 年 32 卷 02 期

页码： 248-251

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。

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