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橡胶树棒孢霉落叶病菌酵母单杂交cDNA文库及CcCas5启动子诱饵载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 胡国豪 1 ; 杨子平 2 ; 刘铜 1 ; 张荣意 1 ; 侯巨梅 1 ;

作者机构: 1.海南大学热带农林学院

2.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

关键词: 橡胶树;多主棒孢;CcCas5;启动子;酵母单杂交;cDNA文库

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2024 年 50 卷 005 期

页码: 205-212

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了筛选出与CcCas5启动子结合的转录因子,本研究构建了橡胶树棒孢霉落叶病菌的酵母单杂交cDNA表达文库和CcCas5启动子诱饵载体,并对3-氨基-1,2,4-三唑(3-amino-1,2,4-triazole, 3-AT)的最佳抑制浓度进行了筛选。结果显示,构建的酵母单杂交cDNA表达文库总容量为3.49×10~6 cfu,插入片段主要分布于750~2 000 bp之间,重组率为95.8%;克隆了CcCas5基因2 600 bp的启动子序列,预测获得真菌主要的10大类转录因子的结合位点165个;构建了分别携带1 500 bp和1 000 bp启动子序列的酵母单杂交启动子诱饵载体,10 mmol/L的3-AT能抑制pHis2.1-pCcCas5-1000和pHis2.1-pCcCas5-1500的背景表达。试验结果为通过酵母单杂交筛选与CcCas5启动子结合的转录因子和进一步研究转录因子对CcCas5表达的调控作用奠定基础。

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