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番木瓜干旱胁迫相关CpDHN基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 郭静远 1 ; 邹智 2 ; 孔华 2 ; 郭运玲 2 ; 郭安平 2 ;

作者机构： 1.海南大学生命科学与药学院

2.海南省南繁生物安全与分子育种重点实验室/中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 番木瓜;脱水素;基因克隆;表达分析;原核表达

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2020 年 41 卷 012 期

页码： 2406-2412

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究基于转录组获得的CpDHN转录本序列,以番木瓜'台农二号'组培苗叶片为材料,采用RT-PCR技术克隆了该基因包含完整ORF在内的425 bp cDNA序列.序列分析表明,CpDHN预测编码93个氨基酸,其理论分子量为10.50 kDa、等电点为6.62、总平均疏水指数为?1.984、核定位.除保守的K片段外,蛋白还含有1个S片段,可归为KS型脱水素.在拟南芥中的10个脱水素中,CpDHN与AtLEA8的亲缘关系最近,相似性为53.3%.值得注意的是,虽然CpDHN的编码区不存在内含子,但其3?UTR含有1个与AtLEA8类似的内含子.表达谱分析显示,该基因在根和叶片中均受干旱胁迫诱导.此外,还构建了CpDHN的原核表达载体,SDS-PAGE分析显示,该蛋白在大肠杆菌中可高效表达.这些结果为下一步的功能鉴定奠定了坚实的基础.

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