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橡胶树AFLP银染体系的建立和优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王惠君 1 ; 和丽岗 1 ; 夏志强 1 ; 王海燕 1 ; 付瑜华 1 ; 卢诚 1 ; 王文泉 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 橡胶;扩增片段长度多态性;基因组DNA;银染

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2007 年 18 卷 04 期

页码： 631-634

摘要： 目的:扩增片段长度多态性(AFLP)为遗传图谱的构建及育种的辅助选择提供了有力的工具。建立一套适合橡胶树的AFLP技术优化体系。方法:以197个GT1×IAN873橡胶树杂交群体为材料,通过对影响AFLP的多种关键因素如模板DNA质量、酶切连接体系、酶切连接反应时间、预扩增体系、选择性体系的分析进行研究。结果与结论:找出一套适于热带植物基因组DNA提取及橡胶树AFLP技术。用改进的CTAB法,经多次抽提纯化,用细玻璃棒挑出DNA得到高质量的模板DNA;酶切连接时DNA模板为250ng,反应体系采用各3U的EcoRⅠ/MseⅡ/T4连接酶,反应时间为9h;预扩增模板为稀释1/2的酶切连接产物,用量为1μL;选择性扩增要用稀释至1/20的预扩增产物。

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