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杨树RAPD标记反应体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 张玉平 1 ; 李丕军 2 ; 朱燕 1 ; 潘青华 1 ; 鲁绍伟 1 ; 李少宁 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院林业果树研究所

2.新疆林业科学院

关键词： 杨树;RAPD;反应体系;扩增程序

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2014 年 30 卷 13 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究主要对杨树RAPD体系进行优化,以银白杨为试材,利用L16(45)正交试验设计和2个单因素试验,研究各主要参数的适宜浓度。结果表明,杨树RAPD优化后的反应体系:20μL反应体系中,含Mg2+1.5 mmol/L、Taq酶2.0 U、引物0.2μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、模板DNA 50 ng。扩增程序为:94℃预变性3 min、94℃变性40 s、38℃退火60 s、72℃延伸90 s,共38个循环;最后在72℃延伸7 min后4℃保温。通过1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测其扩增产物,证明该体系稳定可靠,可以用于杨树的遗传学分析。

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