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农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 高剑 1 ; 肖苏生 2 ; 王文华 2 ; 曾涛 2 ; 曾会才 2 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物技术重点开放实验室

关键词： 香蕉枯萎病;4号生理小种;T-DNA插入;优化体系

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2009 年 28 卷 06 期

页码： 1197-1203

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展。本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD600为0.15、农杆菌经IM液体培养基诱导的时间为7h、乙酰丁香酮(AS)浓度为150μmol/L、Focr4孢子浓度为1×106个/mL、共培养时间为48h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到700～800个转化子/106个香蕉枯萎病菌孢子。PCR验证表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中。目前,应用该转化体系已获得2300多个转化子,为后续克隆相关致病基因打下了良好基础。

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