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木薯MeCWINV4启动子的克隆及其活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 耿彬彬 1 ; 刘姣 2 ; 郭育强 1 ; 符少萍 2 ; 胡新文 1 ; 郭建春 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词: 木薯;MeCWINV4;启动子;序列分析;瞬时表达

期刊名称: 江苏农业科学

ISSN: 1002-1302

年卷期: 2016 年 44 卷 04 期

页码: 36-40

收录情况: 北大核心

摘要: 根据木薯细胞壁转化酶基因MeCWINV4已知编码区序列与木薯基因组数据库中预测的MeCWINV4基因序列信息设计引物,从木薯基因组DNA中对该基因的潜在启动子区进行PCR扩增,经测序比对成功获得1 639 bp序列,其中包含74 bp编码区序列和1 565 bp潜在启动子区序列。用Plant CARE和PLACE软件分析该序列的顺式作用元件,发现该启动子包含CAAT box和TATA box保守元件、大量光反应相关元件与应对高低温胁迫和激素响应相关元件。将MeCWINV4启动子片段取代pVKH表达载体中的CaMV 35S启动子与GUS连接,构建成融合表达载体pVKH-CW4-GUS,通过农杆菌真空渗透法在烟草叶片中进行瞬时表达。结果表明,该启动子驱动了GUS基因在烟草叶片中的表达。说明MeCWINV4启动子具有启动子活性,可以启动目的基因的转录,为进一步研究该基因的调控机制奠定了基础。

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