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橡胶树2个胶乳转化酶基因的原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 刘术金 1 ; 李旖璠 2 ; 唐朝荣 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院橡胶研究所

2.海南大学农学院

关键词: 橡胶树;转化酶;载体构建;原核表达

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2010 年 31 卷 07 期

页码: 1091-1097

收录情况: CSCD

摘要: 转化酶是控制橡胶树胶乳蔗糖代谢和影响胶乳(橡胶)产量的关键酶。将已克隆的2个橡胶树胶乳转化酶基因(HbNIN1、HbNIN2)的编码区插入到原核表达载体pET28a上,经酶切和测序鉴定,成功获得了读框准确的转化酶表达载体(pET-HbNIN1和pET-HbNIN2);再将表达载体转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),对其培养温度、IPTG诱导浓度和培养时间进行优化表达。结果表明,携带2个转化酶基因表达载体(pET-HbNIN1和pET-HbNIN2)的大肠杆菌转化子分别在28℃和37℃条件下,经浓度1.0 mmol/L IPTG诱导6 h实现了目标蛋白(HbNIN1和HbNIN2)的原核高效表达,表达量大于菌体总蛋白的20%,目标蛋白主要以包涵体形式存在。该结果为进一步研究这2种转化酶蛋白的分子特性和抗体制备奠定基础。

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