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列当生防菌Br-2的DsRed红色荧光标记及定殖

文献类型: 中文期刊

作者: 王亚娇 1 ; 纪莉景 2 ; 栗秋生 2 ; 王连生 2 ; 孔令晓 3 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院植物保护研究所河北省有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室

2.;河北省农林科学院植物保护研究所河北省有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室

3.;河北省农林科学院植物保护研究所河北省有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室;

关键词: 列当生防菌;红色荧光蛋白;原生质体转化;定殖

期刊名称: 植物保护学报

ISSN: 0577-7518

年卷期: 2017 年 04 期

页码: 664-670

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探明生防菌Br-2在分枝列当体内及番茄根围的定殖能力,采用PEG-CaCl_2介导的原生质体转化体系将红色荧光蛋白基因DsRed转入到菌株Br-2中,并构建其生长曲线,测定其对分枝列当种子萌发的抑制率,通过共聚焦显微镜观察其在分枝列当茎内及番茄根围的定殖情况。结果表明:通过原生质体转化体系得到了标记菌株Br-2-DsRed,继代培养5代后,其在共聚焦显微镜下仍可观察到亮红色荧光,经PCR检测带有DsRed基因,证明其稳定性好。标记菌株Br-2-DsRed与野生菌株Br-2的生长曲线基本一致,对分枝列当种子萌发的抑制率分别为75.86%和74.14%,无显著差异。显微观察发现,标记菌株Br-2-DsRed接种1 d后即能够侵染分枝列当的茎部表皮,3 d后主要分布在茎表皮和厚壁细胞间隙,5 d后侵染到厚壁细胞及维管束细胞内部并导致茎部腐烂;而标记菌株Br-2-DsRed不能侵染番茄根尖的内部,主要定殖在番茄根尖表面。

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