文献类型： 中文期刊

作者： 晋艺丹 ¹ ; 何旎清 ² ; 程朝平 ² ; 林少俊 ² ; 黄凤凰 ² ; 白康呈 ² ; 张涛 ² ; 汪文潇 ² ; 余敏祥 ² ; 杨德卫 ² ;

作者机构： 1.福建省农业科学院水稻研究所

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关键词： 水稻;稻瘟病;Pigm-1;互作蛋白;OsbHLH148

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2025 年 58 卷 006 期

页码： 1035-1051

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】稻瘟病是水稻最重要的病害之一，稻瘟病抗性基因Pigm-1具有广谱抗性，但其抗病的遗传机制还不清楚，通过筛选并鉴定Pigm-1信号通路中的关键蛋白，为水稻抗病育种提供重要的理论依据。【方法】通过同源重组的方法构建诱饵载体p GBKT7-Pigm-1-CC^1-576，检测诱饵蛋白自激活活性，同时，将p GBKT7和p GBKT7-Pigm-1-CC^1-576质粒分别单独转化Y2H Gold酵母菌株检测诱饵蛋白毒性；利用稻瘟病菌诱导后构建的水稻酵母c DNA文库筛选水稻抗病R蛋白Pigm-1的互作蛋白，并通过Rice Information Gate Way（RIGW）比对与注释测序结果；利用荧光素酶互补（Luc）、免疫共沉淀（Co-IP）和酵母双杂交试验对Pigm-1与Osb HLH148进行互作验证；运用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）对互作蛋白Osb HLH148对应的基因进行组织表达分析。【结果】自激活性检测显示，共转化诱饵蛋白p GBKT7-Pigm-1-CC^1-576与AD质粒没有自激活现象，毒性检测结果表明，诱饵蛋白对酵母细胞毒性较小或没有毒性；通过筛选酵母文库，获得124个可能与Pigm-1互作的蛋白，涉及乙烯合成、赤霉素合成、活性氧清除、酶代谢等相关蛋白，还有功能未知蛋白；利用Luc、Co-IP和酵母双杂交试验验证了Pigm-1-CC^1-576与Osb HLH148具有相互作用；进一步分析发现Osb HLH148受稻瘟病菌诱导表达；Osb HLH148在水稻6周龄的叶片中表达量最高。【结论】获得可能与Pigm-1互作的124个蛋白，其中Osb HLH148与Pigm-1-CC^1-576具有互作关系，推测Osb HLH148可能在Pigm-1介导的稻瘟病抗性中发挥作用。