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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达

文献类型： 会议论文

第一作者： 任文彬

作者： 任文彬 1 ; 张世清 1 ; 黄俊生 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101

关键词： 金龟子绿僵菌;几丁质酶基因;大肠杆菌

会议名称： 第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议

主办单位： 中国微生物学会

页码： 126-133

摘要： 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一.本实验用RT-PCR方法,从本实验室分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blast分析此基因序列与M.anisopliae E6的chi1基因(AF02749)同源率为96％.以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia.coli)BL 21中进行表达.经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63.3％.菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性.

分类号： Q786`Q939.1

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