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几丁质酶产生菌的筛选及其基因克隆

文献类型: 会议论文

第一作者: 周洪妹

作者: 周洪妹 1 ; 郭庆港 1 ; 李社增 1 ; 鹿秀云 1 ; 马平 1 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000

关键词: 生物防治;拮抗细菌;几丁质酶;菌株筛选;基因克隆

会议名称: 中国植物病理学会2009年学术年会

主办单位: 中国植物病理学会

页码: 631-631

摘要: 本文采用平板筛选法对本实验室保存的50株拮抗细菌进行几丁质酶活性分析。将菌株活化后在几丁质平板上点样,30℃培养2d后观察结果。结果显示,有一株解淀粉芽抱杆菌(菌株CAB-1,可有效防治黄瓜白粉病)产生了明显的透明圈,说明其具有几丁质酶活性。提取该菌株基因组DNA,根据GenBank上芽抱杆菌同源几丁质酶基因序列设计引物(P15'ATGATTTTAA GTCTGTCTT3',P2 5'CTCTCCTTTCGTCCACCATT3')对其进行扩增,得到大小约1600bp的片段。PCR产物经回收纯化后,连接到pGM-T载体,转化大肠杆菌DHSao经PCR鉴定后将阳性转化子送到北京诺赛基因公司进行测序。经测序后Blast分析,该序列与己知的几丁质酶基因序列同源性极高,说明其为几丁质酶基因片段。

分类号: S476.19

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