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枯草芽孢杆菌CAB-1抑菌蛋白的分离纯化及其稳定性分析

文献类型： 会议论文

第一作者： 张晓云

作者： 张晓云 1 ; 李宝庆 2 ; 郭庆港 2 ; 鹿秀云 2 ; 李社增 2 ; 马平 3 ;

作者机构： 1.河北农业大学植物保护学院,保定071000

2.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000

3.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定

关键词： 黄瓜白粉病;番茄灰霉病;枯草芽孢杆菌;抑菌蛋白;分离纯化技术;稳定性分析

会议名称： 中国植物病理学会2010年学术年会

主办单位： 中国植物病理学会

页码： 704-704

摘要： 枯草芽孢杆菌CAB-1是一株对黄瓜白粉病和番茄灰霉病有较好防效的生防菌株.在明确该菌株所产生的抑菌物质起主要防病作用的基础上,本实验研究了其所产生的蛋白类抑菌物质,并对抑菌蛋白进行了分离和纯化.首先明确了菌株CAB-1产生抑菌蛋白的最适培养条件为:30℃,180 r/min培养48 h.采用不同饱和度的(NHa)2SO4对菌株CAB-1发酵液进行沉淀，结果表明经30%-70%饱和度(NHa)2SO4沉淀的粗蛋白均有抑菌活性，先采用30%饱和度的(NHa)2SO4进行盐析，上清液中补加(NHa)2SO4至70%饱和度即能沉淀出大部分的抑菌蛋白。抑菌谱试验表明该蛋白类物质对立枯丝核菌等多种植物病原真菌具有明显的抑制作用。蛋白酶、温度、pH值及有机溶剂对抑菌蛋白稳定性的影响试验表明，该蛋白粗提液经胰蛋白酶及蛋白酶K处理后其抑菌活性与对照相比差异不显著，抑菌率分别为对照的93.16%和96.20%，但经胃蛋白酶处理后抑菌率显著下降，为对照的78.90%:粗蛋白热稳定性好，121℃处理30 min仍保持原有活性的72.08%;该蛋白在pH值2-12范围内均有抑菌活性，将pH值调为2后处理30 min其抑菌率仍达到对照的59.01%;此外，该蛋白对常用有机溶剂氯仿、丙酮、乙酸乙酷、乙醚和甲醇不敏感。分别采用疏水层析和阴离子交换层析对抑菌粗蛋白进行了分离纯化，初步结果得到了分子量大小为约30 kD左右的抑菌蛋白。

分类号： S436.421.12`S436.412.13

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