文献类型： 会议论文
第一作者： 王培培
作者： 王培培 1 ; 郭庆港 2 ; 李社增 2 ; 鹿秀云 2 ; 李宝庆 2 ; 马平 3 ;
作者机构： 1.河北农业大学植物保护学院,保定071000
2.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000
3.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定
关键词： 棉花黄萎病;枯草芽孢杆菌;电击转化;电场强度;电阻值;质粒类型
会议名称： 中国植物病理学会2010年学术年会
主办单位： 中国植物病理学会
页码： 705-705
摘要： 本实验主要针对可能影响NCD-2菌株转化的条件(如菌株的电场强度、电阻值和质粒类型)进行优化，以期获得NCD-2菌株的高效电击转化体系。通过设置不同的培养时间(3-4.5h)，不同电压(12.0-14.5 kV/cm)和不同电阻(200Ω,400Ω)。结果发现，NCD-2菌株按1:30比例转接到生长培养基中，37℃,150 rpm培养3.5 h，电场强度14.0 kV/cm，电阻200。的条件下，NCD-2菌株的电击转化效率最高(对质粒pNW33n的转化效率达到3.8x104转化子/pg DNA )。在优化条件下，又测试了5个不同大小并带有不同复制子的质粒对NCD-2菌株的转化效率，结果表明，不同质粒的转化效率依次为:pNW33n(4.21 kb, B. coagulans来源复制子)，pAD123 (5.95 kb, B.subtilis来源复制子)，pHY300PLK04.87 kb, Streptococcus faecalis来源复制子)，pMK3 (7.21 kb, Staphyloccocus aureus来源复制子)，pHV 1249 (9.09 kb, Staphyloccocus aureu来源复制子)。由此可见，影响质粒转化效率的主要因素是其所携带复制子的来源，其次可能是质粒的大小。
分类号： S435.621.29
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