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枯草芽孢杆菌NCD-2菌株抑菌活性突变子的筛选及其相关基因的克隆

文献类型: 会议论文

第一作者: 周洪妹

作者: 周洪妹 1 ; 郭庆港 1 ; 李社增 1 ; 鹿秀云 1 ; 李宝庆 1 ; 马平 2 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000

2.河北省农林科学院植物保护研究所

关键词: 棉花黄萎病;枯草芽孢杆菌;菌株突变子;抑菌活性;菌种筛选;基因克隆

会议名称: 中国植物病理学会2010年学术年会

主办单位: 中国植物病理学会

页码: 711-711

摘要: 本研究利用转座子mini-Tn10插入突变技术构建了该菌株的突变子库,通过拮抗活性测定,筛选到一株对棉花黄萎病菌拮抗能力降低的突变子,并且发现该突变子的菌落形态发生了改变,同野生菌株相比,突变子丧失了表面的褶皱结构,同时发现,突变子丧失了生物膜形成和芽抱产生能力。通过PCR方法证实该突变子中含有转座子mini-Tn 10,以转座子mini-Tn 10的部分序列为探针,通过Southern杂交实验明确了突变子中转座子是以单拷贝的形式插入到NCD-2菌株的基因组中。采用Nest-PCR技术克隆了突变子中转座子插入位点的侧翼序列,序列比对发现该转座子插入位点序列与B.subtilis168菌株中的ywbB基因同源性为96%。采用PCR方法从NCD-2菌株中克隆出ywbB基因及其下游ywbA基因全长序列。其中ywbB为功能未知基因,该基因在生物膜形成的功能方面需进一步采用基因定点敲除和功能互补的方法进行验证。ywbA基因为磷酸转移酶系统酶IIC的渗透酶成分,参与物质运输。

分类号: S435.621.29

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