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木薯eIF4E3基因RNAi载体沉默效果的检测方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

发明人: 张秀春;刘志昕;陈柏岑;冼淑丽

专利号: CN201610936028.5

摘要: 本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种针对靶标木薯eIF4E3基因的RNAi载体的制备及针对该RNAi载体的较为快捷和简便的沉默效果的检测方法的专利申请。构建载体过程为:首先构建含有反义插入片段的中间载体pRNAiCa4E3R,其次将正义插入片段定向插入,获得含有发夹结构的中间载体pRNAiCa4E3,再将其定向插入表达载体pCAMBIA1300,获得RNAi表达载体p1300‑Ca4E3。本申请同时提供了一种较为快捷、操作较为简便的RNAi载体沉默效果的检测方法。所提供检测方法中,不需常规转基因转化育种制备过程,且可规避原生质体制备困难的缺陷,因而可大幅缩短检测时限,具有较好实用性。

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