专利类型： 中国发明申请

专利权人： 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

发明人： 言普;周鹏;沈文涛;黎小瑛

专利号： CN201510355929.0

摘要： 本发明涉及一种DNA分子克隆方法，其包括：获得含有ccdB基因的目标载体，所述ccdB基因两端带有SfiI酶切位点、第一接头序列及第二接头序列，所述接头序列为15‑30bp，所述接头序列在SfiI酶切位点外围；获得目标基因，所述目标基因经PCR扩增使其两端同样带有接头序列，其序列与上述第一接头序列和第二接头序列分别一致；将所述含有ccdB基因的目标载体与所述目标基因，SfiI酶和Gibson克隆反应液混合反应，再经转化大肠杆菌获得重组克隆。通过本发明的方法可将DNA通过一步反应直接克隆到环状的目标载体，不受目标DNA序列限制，并且零背景。